氨基酸等电点的计算和应用
soelectric point):氨基酸的等电点在一定 pH条件下,某种氨基酸接受或给出质子的程度相等,分子所带的净电荷为零,此时溶液的pH值就称为该氨基酸的等电点(pI)
NH3+NH3+NH2
|+OH- |+OH-|
H-C-COOH======== H-C-COO-======H-C-COO-
| +H+ | +H+ |
R RR
阳离子 两性离子 阴离子
pHpI
氨基酸等电点的计算
公式: pH=(pKn+pKn+1)/2
n:氨基酸(或多肽)完全质子化时带正电荷基团数
pK:解离基团的解离常数
等电点时溶液的pH与氨基酸的浓度无关。通常氨基酸的的酸解离与碱解离的程度不同,纯氨基酸溶液不能达到其等电点,可以通过加入酸或碱调节其 pH以达到等电点pH
等电点的计算步骤
先将氨基酸/多肽可解离基团的pK值自小到大按顺序排列
判断n值
判断氨基酸的分类
酸性氨基酸和中性氨基酸的完全质子化数 n=1
碱性氨基酸的完全质子化数 n=2
等电点的应用1------电泳分离
应用------氨基酸的分离与分析
氨基电泳:带电颗粒在电场中******的现象称为电泳
酸不同(pI不同,大小不同),在电场中泳动速度不同,因此可以通过电泳将氨基酸彼此分开
当pH=pI时,氨基酸呈兼性离子,在电场中不******
当pH>pI时,氨基酸带负电荷,在电场中向正极******
当pH蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极******,从而分离蛋白质。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。
等电点应用2------蛋白质沉淀与分离
处于等电点的蛋白质溶解度最小。当蛋白质混合物的 pH 被调到其中一种成分的等电点时,该蛋白质将大部分或全部沉淀下来。那些等电点高于或低于该 pH的蛋白质仍保留在溶液中,可利用此性质进行蛋白质的分离。这样沉淀出来的蛋白质保持天然构象,能再溶解于水并具有天然的活性
参考文献
<1> 李克安《分析化学教程》?
北京大学出版社出版2005年5月第1版
<2> 陈阅增《普通生物学----生命科学通论》
高等教育出版社1997年出版******
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    食品检测

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    2012-10-14 22:00:00

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